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          瓊脂糖電泳常見問題及解決方案
          更新時間:2025-06-10瀏覽:450次

            瓊脂糖電泳常見問題及解決方案

            以下是瓊脂糖電泳常見問題及解決方案的總結(jié):

            一、?條帶異常問題?

            條帶模糊/拖尾?

            原因?:DNA降解、緩沖液陳舊或上樣過量

            解決?:

            使用新鮮緩沖液(TAE/TBE),避免反復使用;

            減少上樣量(每孔≤10μL),避免超載;

            檢查核酸酶污染,確保樣品純度。

            條帶扭曲或"笑臉型"?

            原因?:電場不均、梳子拔出不當或膠體凝固不均


            解決?:

            預(yù)電泳5分鐘(低電壓)平衡電場;

            垂直緩慢拔梳子,避免孔變形。

            Marker條帶不清晰?

            原因?:膠濃度不合適或染料分布不均

            解決?:

            調(diào)整膠濃度(0.8%-2%按片段大小選擇);

            改用泡染法(如GelRed后染色)。

            二、?電泳過程問題?

            DNA遷移異常?

            電壓過高?:>10V/cm易致條帶擴散,建議5-8V/cm;

            緩沖液錯誤?:避免用自來水或高濃度母液,需1×TAE/TBE。

            凝膠漂浮或緩沖液不流動?

            原因?:冷卻泵故障或密封不良

            解決?:檢查設(shè)備密封性,調(diào)整蠕動泵速度。

            三、?其他關(guān)鍵問題?

            無條帶顯示?

            原因?:電極接觸不良、DNA未染色或樣品降解

            解決?:檢查電極連接,確認染料活性。

            背景熒光高?

            原因?:膠體雜質(zhì)或紫外曝光過久

            解決?:過濾瓊脂糖溶液,縮短紫外觀察時間。

            拖尾現(xiàn)象?

            原因?:DNA結(jié)合蛋白或鹽分污染

            解決?:酚/氯仿純化樣品,乙醇沉淀去鹽。

            四、?預(yù)防性建議?

            制膠?:微波加熱瓊脂糖至透明,冷卻至60℃再加染料;

            維護?:每次使用后蒸餾水沖洗電極,避免鹽結(jié)晶腐蝕;

            保存?:Marker需-20℃避光保存,避免反復凍融。

            通過規(guī)范操作與針對性調(diào)整,可顯著提升電泳結(jié)果質(zhì)量。

            BS-300   基礎(chǔ)性電泳儀電源

            BS-600C  通用型電泳儀電源

            BS-mini01  垂直電泳槽(雙板)

            BS-mini04  垂直電泳槽(四板)

            BS-ZY03   轉(zhuǎn)印電泳槽(WB雙板和鉑樂通用)

            BS-ZY04   轉(zhuǎn)印電泳槽 (WB四板)

            BS-sub02  瓊脂糖電泳槽

            注:以上資料僅供參考,具體請咨詢技術(shù)老師。

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