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          人可溶性粘附分子(Sam)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)說(shuō)明書(shū).doc
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            一、產(chǎn)品基本信息

            BS-0245人可溶性粘附分子(Sam)ELISA試劑盒

            檢測(cè)原理

            采用雙抗體夾心ELISA法:

            預(yù)包被單克隆抗體捕獲樣本中SAM抗原

            生物素標(biāo)記多克隆抗體作為檢測(cè)抗體

            TMB顯色系統(tǒng)(450nm測(cè)定)實(shí)現(xiàn)定量分析

            試劑盒組成

            組分規(guī)格/說(shuō)明

            預(yù)包被微孔板96孔/板(可拆卸)

            SAM標(biāo)準(zhǔn)品0-1000pg/ml梯度濃度

            生物素標(biāo)記抗體100×濃縮液

            HRP-親和素結(jié)合物100×濃縮液

            TMB底物液避光保存

            終止液2Mliusuan溶液

            二、實(shí)驗(yàn)操作流程

            樣本預(yù)處理

            血清/血漿:EDTA抗凝,1000×g離心15分鐘

            細(xì)胞上清:去除沉淀后-70℃分裝保存

            標(biāo)準(zhǔn)曲線制備

            步驟參數(shù)

            稀釋標(biāo)準(zhǔn)品按1:3梯度稀釋(建議7個(gè)濃度點(diǎn))

            加樣量每孔100μl

            孵育條件37℃ 60分鐘

            檢測(cè)步驟

            1. 加樣:標(biāo)準(zhǔn)品/樣本→生物素抗體→HRP結(jié)合物 2. 洗滌:PBST緩沖液洗板5次(每次浸泡30秒) 3. 顯色:TMB避光反應(yīng)15分鐘→終止液終止

            三、質(zhì)量控制要求

            指標(biāo)可接受標(biāo)準(zhǔn)

            標(biāo)準(zhǔn)曲線R2值≥0.990

            板內(nèi)CV≤10%

            板間CV≤15%

            回收率85-115%

            四、注意事項(xiàng)

            關(guān)鍵操作

            避免反復(fù)凍融標(biāo)準(zhǔn)品(建議分裝儲(chǔ)存)

            顯色時(shí)間需精確控制(±30秒誤差)

            安全警示

            終止液具有強(qiáng)腐蝕性(需佩戴護(hù)目鏡)

            廢液需用10%NaOH中和后處理

            數(shù)據(jù)判讀

            建議使用四參數(shù)擬合算法(4PL)

            溶血/脂血樣本需備注說(shuō)明

            注:以上資料僅供參考,具體請(qǐng)咨詢(xún)品牌供應(yīng)商或技術(shù)老師。

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