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          兔子腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒實驗使用說明書
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            兔子腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒實驗使用說明書

            BS-4142 兔子腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒

            一、實驗原理

            本試劑盒采用雙抗體夾心法測定兔血清、血漿等樣本中TNF-α濃度。通過預包被TNF-α抗體的微孔板與樣本中抗原結合,再與HRP標記的二抗形成復合物,經(jīng)TMB底物顯色后,通過450nm波長測定吸光度(OD值),標準曲線計算濃度。

            二、試劑盒組成

            組分規(guī)格(96T)儲存條件

            預包被微孔板1塊(96孔)4℃(短期)/-20℃(長期)

            標準品(TNF-α)1瓶(1.0mL)-20℃避光保存

            HRP標記抗體1瓶(8.0mL)4℃避光

            TMB底物液1瓶(6.0mL)4℃避光

            終止液1瓶(6.0mL)室溫

            三、實驗步驟

            樣本處理

            血清/血漿:4℃靜置2小時或過夜,1000×g離心20分鐘,取上清分裝保存(-20℃≤1個月,-80℃≤2個月)。

            避免溶血或反復凍融。

            檢測流程

            加樣:標準品梯度稀釋(1.37-1000pg/mL)及樣本各100μL/孔,37℃孵育90分鐘。

            洗滌:PBST洗滌3次,每次拍干。

            顯色:加入TMB底物避光反應15分鐘,終止液終止后30分鐘內測OD值。

            四、注意事項

            試劑使用前需平衡至室溫,不同批次不可混用。

            酶標儀預熱至450nm,建議雙孔復測以減少誤差。

            顯色液避免強光照射,終止后及時讀數(shù)。

            五、結果分析

            以標準品濃度(pg/mL)為橫坐標、OD值為縱坐標繪制標準曲線,樣本濃度通過曲線擬合值乘以稀釋倍數(shù)計算。

            六、儲存與有效期

            未開封試劑盒:按標簽溫度保存(-20℃或4℃),有效期12個月。

            已拆封微孔板:需干燥劑密封保存于-20℃,建議1個月內用完。

            注:以上資料僅供參考,不作為實驗依據(jù),具體產品說明請咨詢品牌供應商或技術老師。

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